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紫外分光光度法测定虎杖中白藜芦醇的含量



虎杖PolygonumcuspidatumSied.etZucc,又名斑根紫金龙、活血龙、阴阳莲,其根茎具有活血定痛、清热利湿、止咳化痰浸染。首要用于枢纽麻木、湿热黄疸、经闭、咳嗽痰多、水火烫伤、跌打损伤等症的治疗。当代药理研究表白其首要有用活性因素白藜芦醇具有抗癌、抗氧化、抗血小板凝结、抗菌、调理脂类代谢等多种成果。今朝定量检测白藜芦醇的要领首要有高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱/质谱法(GC/MS)以及气相色谱法(GC)等。本尝试应用紫外分光光度法测定了虎杖提取液中白藜芦醇含量。现报道如下。
1仪器与试药
1.1仪器
GoldS54紫外可见分光光度计(上海棱光技能有限公司);AB204-N电子天平(Mettler-Toledo装备有限公司);FC-160型锤式毁坏机(上海中药机器厂制造)。
1.2试剂
虎杖药材购自江西省药材公司(产地江西樟树),经江西医学院冯江传授判断为正品虎杖,白藜芦醇比较品由中国药品生物成品检讨所提供,水为重蒸馏水,其他试剂均为说明纯。
2要领与功效
2.1比较品溶液的制备慎密称取干燥恒重的白藜芦醇比较品5.4mg,于50ml棕色容量瓶中,用甲醇消融并稀释至刻度,摇匀,即获得0.108mg·ml-1的比较品溶液。
2.2供试品溶液的制备精确称量细块状虎杖10.0g,加10倍量的水,在沸腾状态下提取180min,提取1次,冷却后将提取液过滤,滤液定容至必然体积,即为供试样品液。慎密称取必然量试液于50ml容量瓶中,用甲醇消融并稀释至刻度,摇匀,作为供试品溶液。
2.3测定波长的选择将白藜芦醇比较品和供试品溶液按尝试要领操纵,在200~500nm举办波长扫描。功效表白,比较品和供试品溶液均在305nm处有最大接收,且两者光谱外形极为相似,满意分光光度法测定的根基要求。因此,选定305nm作为测定波长。
2.4尺度曲线的绘制别离慎密汲取“2.1”项下比较品溶液0,0.3,0.6,0.9,1.2,1.5ml各置于10ml容量瓶中,以甲醇定容至刻度,摇匀,即得浓度别离为0,3.24,行业标准,6.48,9.72,食品检测,12.96,16.20μg/ml的比较品溶液。以甲醇做参比,别离测定305nm吸光度,以吸光度(A)对浓度(C)举办线性回归,得回归方程A=0.13427C 0.04859(r=0.9990)。功效表白,白藜芦醇检测浓度在3~16μg/ml范畴内与吸光度线性相关精采。见表1及图1。表1白藜芦醇尺度溶液的浓度与吸光度(略)
2.5一再性尝试取统一批虎杖样品,慎密称取4份,按“2.2”项下要领别离制备成4份供试品溶液。在305nm下别离测定其吸光度并计较白藜芦醇的含量。功效(见表2)表白,4份提取液中白藜芦醇的均匀含量为1.46%,RSD=2.41%(n=4)。表2白藜芦醇含量测定功效(略)
2.6接纳率尝试回收加样接纳法,慎密汲取已知含量为3.32μg/ml虎杖提取液2ml于25ml容量瓶中,插手3.24μg/ml比较品溶液2ml,各4份,用甲醇稀释至刻度,摇匀,测定吸光度,计较接纳率。功效获得均匀接纳率为98.8%,RSD为1.35%。
3小结

本尝试成立了紫外分光光度法测定虎杖提取物中白藜芦醇的要领。尝试表白,本法具有操纵简朴、速率快、精确度高的利益。其加样接纳率和一再性均较好,可作为一种虎杖提取液中白藜芦醇含量测定的要领。


来源:中国植物提取物网



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